产品货号：
MT3604
中文名称：
高效RNA体外合成试剂盒(耐热型)
英文名称：
产品规格：
10T|50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒可在体外高效合成多种类型的RNA，如mRNA、lncRNA、shRNA等。利用T7 RNA聚合酶2.0识别T7 promoter（TAATACGACTCACTATA G G）以方框中G碱基为起点开始转录，该试剂盒可以将少量样本进行高效转录，单次反应可获得高达150μg的产物，转录长度可达5000nt以上。
本试剂盒利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用，如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义RNA及RNAi实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和RNA疫苗等。
本试剂盒使用方便，有利于用户快速建立反应。本试剂盒还配备了DNase I，在RNA合成完毕后可快速去除DNA模板，便于获得高纯度转录RNA。
本试剂盒组分中含有耐热型T7 RNA聚合酶2.0可在37～52℃条件下进行高效的体外转录，最佳温度为37℃，50℃反应条件下仍然保留50%以上的活性。这种高温的反应特性有益于以下几个方面的实验：
- 提升了GC含量较高RNA的转录效率；
- 提升了长片段RNA的合成能力；
- 在使用帽类似物时，提高了共转录的加帽效率；
- 减少了dsRNA副产物的形成，降低了合成RNA的免疫原性。
| 组分 | 10T | 50T |
| 5×T7 Transcription Buffer | 1mL | 1mL |
| T7 2.0 Transcript Enzyme Mix | 20μL | 100μL |
| rNTP Mixture（25mM each） | 40μL | 200μL |
| RNase Free DNase I(10U/μl) | 20μL | 100μL |
| 10×RD Buffer | 1mL | 1mL |
| RNase Free H2O | 1mL | 1mL |
保存：-20℃，避免反复冻融，有效期2年。
- 按下表加入各成分配置反应体系
成分 用量 5×T7 Transcription Buffer 4μL 转录模板DNA 0.2～1μg rNTP（25mM each） 3.2μL T7 2.0 Transcript Enzyme Mix 2μL RNase-Free H2O 至20μL
注：DNA模板应为线性化DNA，无RNase、蛋白、盐、EDTA、A260/280值在1.8～2.0。 - 37℃～50℃反应1~3h，转录RNA产量在80～150μg。
- 转录完毕后，如需去除模板DNA，20μL反应液中加入5μL的10×RD Buffer、2μL的RNase-Free DNase I、23μL的RNase-Free H2O至50μL，37℃孵育15min。
- 整个反应完毕后可取0.2～0.5μL转录产物进行电泳检测，并采用RNA快速纯化试剂盒(货号：MT0126)进行RNA的纯化（或经典LiCl沉淀法纯化），并保存于-80℃。
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